火鸡疱疹病毒探针法荧光定量PCR试剂盒价格
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品种名:火鸡疱疹病毒探针法荧光定量PCR试剂盒价格 单只重:公斤以下 苗龄: 成活率:% 公母:
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服务流程:

1、根据客户提供的基因序列设计特异性引物和荧光探针(染料法只需设计引物)

2、抽提DNA、RNA,并对RNA进行逆转录

3、实时荧光定量PCR

4、提供完整的实验结果报告(检测数据、溶解曲线、扩增曲线)

5、返还样品(引物、RNA和cDNA)

产品名称

英文名称

货号

火鸡疱疹病毒探针法荧光定量PCR试剂盒价格

Herpesvirus of Turkey (HVT)

EY01P2111

样品RNA的抽提

①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。

②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的氯仿,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚氯仿相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。

③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。

④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。

 

RNA质量检测:

火鸡疱疹病毒探针法荧光定量PCR试剂盒价格1)紫外吸收法测定

先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。

浓度测定

A260下读值为1表示40 g RNA/ml。样品RNA浓度(g/ml)计算公式为:A260 ×稀释倍数× 40 g/ml。具体计算如下:

RNA溶于40 l DEPC水中,取5ul,1:100稀释至495的TE中,测得A260 = 0.21

RNA 浓度= 0.21 ×100 ×40 g/ml = 840 g/ml 或 0.84 g

5ul用来测量以后,剩余样品RNA为35 l,剩余RNA总量为:

35 l × 0.84 gl = 29.4 g

②纯度检测

RNA溶液的A260/A280的比值即为RNA纯度,比值范围1.8到2.1。

2)变性琼脂糖凝胶电泳测定

①制胶

1g琼脂糖溶于72ml水中,冷却至60℃,10 ml的10× MOPS电泳缓冲液和18 ml的37% 甲醛溶液(12.3 M)。

10×MOPS电泳缓冲液

浓度 成分

0.4M MOPS,pH 7.0

0.1M 乙酸钠

0.01M EDTA

灌制凝胶板,预留加样孔至少可以加入25 l溶液。胶凝后取下梳子,将凝胶板放入电泳槽内,加足量的1×MOPS电泳缓冲液至覆盖胶面几个毫米。

 

使用方法:

一、稀释PCR阳性对照(以10E2-10E7拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)

1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。

2. 标记6个离心管,分别为7,6,5,4,3,2。

3. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液(用带芯枪头,下同)。

4. 在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡1分钟,得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。

5. 换枪头,在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。

6. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中,充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。

7. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

二、样品DNA的制备

8. 如果有N个样品,必须设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步制备的PCR阳性对照的第4号(浓度为1×10E4 拷贝/μL,10μL相当于1万拷贝)或第5号(浓度为1×10E5 拷贝/μL,10μL相当于10万拷贝)再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。如果每次制备需要200μL样品,则PC和NC的体积也必须是200μL。

9. 用自选方法纯化样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。

三、设置qPCR反应(20 μL体系,在样品制备室进行)

10. 如果只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照,6个用于PCR阳性对照。如果做2-3次重复,则反应设置数量相应增加2或3倍。

11. 产品仅用于科研在标记管中按下表加入各成分(本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后加)

以下是公司正在促销打折产品:

索氏梭状芽孢杆菌英文名称  Anti-AKT3 中文名称  蛋白激酶B3 别    名  AKT3 kinase; DKFZP434N0250; PKB Gamma; PKBG; PRKBG; Protein Kinase AKT3; Protein Kinase B Gamma; RAC gamma; RAC Gamma Serine/Threonine Protein Kinase; RACPK Gamma; Serine threonine protein kinase Akt 3; Serine Threonine Protein Kinase AKT3; STK 2; STK2; V akt murine thymoma viral oncogene homolog 3 protein kinase B gamma; VAKT Murine Thymoma Viral Oncogene Homolog 3; AKT3_HUMAN. 浓    度  1mg/1ml 规 格  0.1ml/100μg  0.2ml/200μg产品应用   WB=1:200-600  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  Flow-Cyt=1:100-500  IF=1:100-500

生孢梭菌(生孢梭状芽孢杆菌)英文名称  Anti-APE/Girdin 中文名称  肌动蛋白结合蛋白Girdin抗体 别    名  Akt phosphorylation enhancer; APE; Coiled coil domain containing protein 88A; G alpha interacting vesicle associated protein; Girders of actin filament; GIV; HkRP1; Hook related protein 1; AKT iphosphorylation enhancer; Akt phosphorylation enhancer; Ccdc88a; GIV; GRDN; GRDN_HUMAN; HkRP1; Hook related protein 1; Hook-related protein 1; KIAA1212. 浓    度  1mg/1ml 规 格  0.1ml/100μg  0.2ml/200μg 产品应用   WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  ICC=1:100-500  IF=1:100-500

梭状芽孢杆菌属通用英文名称  Anti-phospho-AXL (Tyr698+Tyr702+Tyr703) 中文名称  磷酸化粘附相关激酶抗体 别    名  Adhesion related kinase; AI323647; Ark; Axl; AXL oncogene; AXL receptor tyrosine kinase; AXL transforming gene; AXL transforming sequence/gene; EC 2.7.10.1; JTK11; Oncogene AXL; Tyro7; Tyrosine protein kinase receptor UFO; Tyrosine-protein kinase receptor UFO; UFO; UFO_HUMAN. 浓    度  1mg/1ml 规 格  0.1ml/100μg  产品应用   WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  Flow-Cyt=1:100-500  IF=1:100-500

破伤风梭状芽孢杆菌英文名称  Anti-phospho-AKT1/AKT2/AKT3(Thr308+Thr309+Thr305) 中文名称  磷酸化蛋白激酶B抗体 别    名  AKT1 (phospho T308); AKT2 (phospho T309); AKT3 (phospho T305); p-AKT1 (phospho T308); p-AKT2 (phospho T309); p-AKT3 (phospho T305); AKT 1; AKT; AKT1; AKT-1; AKT1_HUMAN; AKT 2; AKT2; AKT-2; AKT2_HUMAN; AKT 3; AKT3; AKT-3; AKT3_HUMAN; C AKT; cAKT; MGC9965; MGC99656; Oncogene AKT1; PKB; PKB alpha; PKB-ALPHA; PKB beta; PKB gamma; PRKBA; Protein Kinase B Alpha; Protein kinase B; Proto-oncogene c-Akt; RAC Alpha; RAC alpha serine/threonine protein kinase; RAC; RAC PK Alpha; Rac protein kinase alpha; RAC Serine/Threonine Protein Kinase; RAC-alpha serine/threonine-protein kinase; RAC-PK-alpha; v akt murine thymoma viral oncogene homolog 1; vAKT Murine Thymoma Viral Oncogene Homolog 1. 浓    度  1mg/1ml 规 格  0.1ml/100μg 产品应用   WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  Flow-Cyt=1:100-500  IF=1:100-500
火鸡疱疹病毒探针法荧光定量PCR试剂盒价格β-细辛脑对照品产品CAS:5273-86-9

规格含量:20mg

β-细辛脑对照品

英文名称:β-Asarone

别名:顺式细辛脑

分子式:C12H16O3

分子量:208.25

CAS号:5273-86-9
注意事项:

1. 建议使用新鲜采取的动物组织,若为长期冷冻组织,应尽量避免反复冻融,否则会导致模板的降解,影响PCR效率。

2. 试剂Buffer AL若低温保存,易产生沉淀。在使用前务必将其在室温中放置一段时间,也可在37℃水浴中预热10 min,以溶解沉淀,混匀后再使用。

3. 电泳检测时,切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否则,电泳时会在泳道中出现一大团拖尾亮带,影响实验结果。

4. 建议扩增片段长度1 kb以内,以便扩增效率佳。

5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

保存方式

冰袋运输。-20℃避光储存,有效期一年。本品避免反复冻融。建议分装保存。